веществами, участвующими в реализации защитных реакций при фагоцитозе, воспалении и стрессе. Ведущую роль в уничтожении микроорганизмов играет группа катионных белков, таких как, бактерицидный проницаемость увеличивающий белок, миелопероксидаза (МПО), лактоферрин, эластаза, катепсин G, лизоцим.
Данная работа является частью сравнительного исследования молекулярных факторов врожденного иммунитета собаки и волка, которое проводится в нашей лаборатории, и представляет собой несомненный интерес в сравнительно-эволюционном плане.
Поиск антимикробных белков в лейкоцитах волка мы начали с лизосомального катионного теста. Нам удалось установить, что при обработке мазков крови волка прочным зеленым наблюдается интенсивное окрашивание гранул нейтрофилов, что свидетельствует о присутствии в них катионных белков и пептидов.
Мы экстрагировали белки из лейкоцитов волка, гомогенизировав клетки в 0,02 М натрий ацетатном буфере (pH 4,6), содержащем 0,3% бромид цетилтриметиламмония. Процедуру экстракции повторяли 6 раз. Сравнение электрофоретических подвижностей белков экстрактов и ранее выделенных нами антимикробных белков собаки, а также определение ферментативных активностей, позволили нам выявить в данных экстрактах следующие антимикробные белки: миелопероксидазу, лизоцим, эластазу и катепсин G. Ферментативную активность миелопероксидазы определяли ортодианизидиновым методом. За наличием эластазоподобной эстеразной активности следили по гидролизу n-нитрофенолового эфира бутилтриокси-L-аланина, а активности катепсина G – по гидролизу этилового эфира бензоилтирозина. Максимальная активность МПО и эластазы наблюдалась в первом экстракте, а максимум химотрипсиноподобной активности катепсина G приходится на 3 экстракт.

Следует заметить, что клетки крови собаки, несмотря на присутствие в них катионных АБ, не окрашиваются прочным зеленым, однако наличие катионных антимикробных пептидов в нейтрофилах собаки до сих пор не установлено. Эта информация может косвенно свидетельствовать о наличие у волка АП, которые отсутствуют у собаки. Важно учитывать, что спектр антимикробных пептидов

217

« Предыдущая     Следующая » 

206 207 208 209 210 211 212 213 214 215