наблюдался в препаратах цельного молозива 1-2 дня и цельного зрелого молока.

ПОДБОР КРИОПРОТЕКТОРОВ ДЛЯ ЛИОФИЛИЗАЦИИ
ПЦР-ТЕСТ-СИСТЕМ
С.С. Коннова, м.н.с., З.С. Юсупова, м.н.с., Н.А. Осина, с.н.с.
РосНИПЧИ “Микроб”. Саратов, Россия

Необходимость хранения генодиагностических препаратов в низкотемпературных условиях, многоэтапность приготовления реакционной смеси ex tempore из отдельных ингредиентов ограничивают применение ПЦР при работе в полевых условиях (СПЭБ или других мобильных формированиях). Поэтому актуальной задачей остается оптимизация комплектации ПЦР–тест–систем, в частности, путем лиофилизации смеси, включающей все компоненты, необходимые для проведения реакции амплификации. Проведенные ранее работы по лиофилизации белков и бактериальных суспензий показали, что препараты перед высушиванием требуют стабилизации, для чего к ним добавляют специальные вещества – криопротекторы (БСА, тиосульфат натрия, сахара). Однако вопрос о выборе криопротекторов для лиофилизации реакционных смесей для ПЦР до сих пор не решен.
Цель работы - подбор криопротекторов для лиофильного высушивания реакционной смеси для ПЦР.
Реакционные смеси для лиофилизации формировали из компонентов «Тест-системы для выявления ДНК V. cholerae (ctxA+) методом ПЦР». В качестве стабилизаторов были выбраны следующие вещества: сахароза, сорбит, маннит, трегалоза. Криопротекторы добавляли в состав реакционных смесей до конечной концентрации от 3 до 10 %. Эффективность лиофилизации определяли по консистенции образуемого осадка и чувствительности ПЦР с полученным препаратом.

Показано, что лиофилизация реакционных смесей с добавлением сорбита, сахарозы и трегалозы приводила к формированию на дне пробирки равномерной пленки, при внесении маннита – наблюдалось

214

« Предыдущая     Следующая » 

203 204 205 206 207 208 209 210 211 212