новые избирательные эффекторы различных клеточных процессов, которые могут использоваться как инструменты для исследования этих процессов, а также служить основой для создания новых лекарственных средств.
Нами были впервые испытаны цельные яды шести видов змей: гадюки Никольского, эфы среднеазиатской, щитомордника камениcтого, африканской шумящей гадюки,степной гадюки игюрзы – по их способности блокировать ответ на ацетилхолин (ACh) и Ba ток через потенциалозависимые Ca каналы в идентифицированных нейронах прудовика Lymnaea stagnalis. Работа проведена методом регистрации трансмембранного тока в режиме фиксации мембранного потенциала и внутриклеточной перфузии. Все испытанные яды в той или иной степени блокировали никотиновые рецепторы АCh и потенциалозависимые Ca каналы. Наиболее активным оказался яд африканской шумящей гадюки Bitisarietans, одной из самых больших и опасных змей жаркого и умеренного пояса Африки. С целью идентификации и структурной характеристики активных соединений яд B. arietans подвергали фракционированию с использованием различных видов жидкостной хроматографии. На первой стадии использовали гель-фильтрацию на Сефадексе G-50. Тестирование биологической активности полученных фракций выявило наличие соединений, блокирующих холинорецепторы и Са каналы, в нескольких фракциях. Наиболее активную из них (блок ACh-индуцированного тока на 65% и потенциалозависимого входящего тока на 95%) далее разделяли методом обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Анализ активности фракций показал, что эффективные блокаторы холинорецепторов находятся в двух фракциях, содержащих полипептиды с молекулярными массами около 7 кДа, в то время как соединения, с умеренной эффективностью блокирующие Са каналы, находятся во фракциях, содержащих полипептиды с молекулярными массами от 1 до 3 кДа. Таким образом, нами впервые показано наличие в ядах гадюк соединений, блокирующих никотиновые холинорецепторы и потенциалозависимые Са каналы.
Работа поддержана грантами РФФИ 06-04-49198 и 06-04-48982.

105

« Предыдущая     Следующая » 

095 096 097 098 099 
100 101 102 103 104